实习二十三  肝脏功能检查

    一、目的要求  

   （一)了解胆红素代谢功能试验，血清蛋白质测定，血清蛋白电球。血清转氨酶测定的基本原理。

(二)掌握阻塞性黄疽、肝细胞性黄疽及溶血性黄疽的实验室区别。

(三)掌握常用肝功能检查正常值临床意义和选用原则。

二、见习方法

(一)辅导教师讲解重点及注意事项。

(二)学生按实习指导要求进行尿胆红素、尿胆原，血清胆红素测定。

(www.med126.com/jianyan/三)讨论、总结。

三、见习用具

     白工作衣自备，其它用具由实验室准备。

四、见习内容

(一)尿胆红素试验Harrison法

原理：

  用氯化钡吸附尿液中胆红素后，滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素氧化成胆绿素而呈绿色反应。

试剂：

l、Fouchet试剂——酸性三氯化铁试剂

称取三氯乙酸25g，加蒸馏水少许溶解，再加入三氯化铁0.9g，溶解后加蒸馏水至lOOml。

2、100g／L氯化钡溶液：

操作：

1、取尿液约www.med126.com/rencai/5ml，加100g/L氯化钡溶液3～5滴，此时出现白色沉淀物。

2、将上述浑浊尿离心后，弃去上清液，留离心沉淀物在管底，加入Fouchet试剂九滴，轻轻弹动试管。呈绿、蓝色反应者为阳性，否则为阴性。

尿胆红素试验试纸法：

原理、操作、结果判断(参阅“目测八联试纸法”)

(二)尿胆原定性检查

1、原理

尿胆原在酸性溶液中可和Ehrlich氏醛试剂中的对二甲氨基苯甲醛发生醛化反应而形成樱桃红色化合物。

2、用具和试剂

Ehrlich醛试剂，5毫升吸管1支，10毫升小试管3支，蒸馏水。

3、操作方法：

  (1)取3支小试管，编成1：10、1：20、1：40。

  (2)第一管放蒸馏水4.5毫升，以下每管放蒸馏水2毫升。

  (3)第一管放入被检小便0.5毫升，吸吹3次混匀，吸出3毫升，放2豪升入第二管，余1毫升弃去，在第二管吸吹3次，吸2毫升于第三管，吸吹3次，弃去2毫升。

   (4)每管加Ehrlich试剂4滴，然后自管口向下观察，以最高稀释度的一管仍呈阳性反应者为终点管并记录之。(如阴性，记录最浓一管，如阳性则记录最稀一管)。

4、正常值及临床意义

正常值：正常情况下，每24小时由尿排出的尿胆原少于3.5mg/L，一般定性试验呈弱阳性反应，其阳性稀释厦应在1：20以下。

临床意义

①肝细胞性黄疸时，由于受损细胞不能将从肠道重吸收的尿胆原充分氧化为胆红素再排入肠道，因而经体循环由尿排出的尿胆原增多。在急性肝炎病人有时其他试验尚属正常时，尿中尿胆原含量即已增多，因此，它是一个较为敏感的肝功能试验。病毒性肝炎的早期尿胆原增高，在黄疽的极期，可因胆红素排入肠道的量减少，而使尿中尿胆原减少。

②溶血性黄疸时，胆红素形成增多，由肠道吸收的尿胆原亦随之增多，故尿中尿胆原增高。溶血引起肝细胞功能损伤时，也能引起尿中尿胆原增多。

③阻塞性黄疸时，尿中尿胆原可消失，如连续数天尿中无尿胆原，提示可能是由于恶性肿瘤引起了胆道完全阻塞。胆石引起的阻塞性黄疸呈间歇性的尿胆原消失或减少。

④肝硬变及中毒引起的肝损害，尿胆原试验常为阳性。

⑤此外，发热、心功能不全、便秘等亦可使尿胆原稍高。

(二)试纸法

原理、操作、结果判断，参阅“目测八联试纸法”

三、尿胆素检验

尿胆素的临床意义与尿胆原同。

肝功能检查

血清总胆素和直接胆红素测定

化验原理

Bilirubin(Direct)+Diazotized →sulfanic acid Azobilirubin

Bilirubin(Total)+Diazotized sulfanic Acid Azobilirubin

Azobilirubin在540nm波长有特定吸收峰

    试剂

1、盐酸试液：HCL0.1N·1×240ml

2、咖啡因试液(Caffeine Reagent)：Caffeine 0.128mole／L·1×240ml

3、苯磺酸试剂：sulfanic acid7.1mmole／L·8×15ml

4、亚硝酸钠试剂：sodium nitrite 25 mmole／L·1× lOml

5、胆红素标准液：Biliurbin 10mg／dl(171 umole／L)·2ml

    检验注意事项

1、采取新鲜未溶血之血清。

2、室温下须于2小时内完成化验。

3、2～5℃下亦须于12小时内完成化验。

化验方法

取1.25ml亚硝酸钠试液加人苯礴酸试液配成偶氮试液，可稳定7天(2-8℃蔽光下)

温度：25or30℃

※测直胆红素时，空白对照要以盐酸试剂代替咖啡因试剂。

计算

Factor=标准液浓度（171)

标准液吸光值

总胆红素=总胆红素吸光值×Factor

直接胆红素=直接胆红素吸光值×Factor

间接胆红素=总胆红素-直接胆红素

正常值

成人总胆红素：0.3～1.2mg/dl(5.13～20.52umole/l)

直接胆红素：<0.2mg/dl(3.42umole/l)

间接胆红素：0.2～0.7mg/dl(3.42～11.97umole/l)

适用范围

线性界限：20mg/dl(342umole/l)

总胆红素若超过20mg/dl(342umole/l)时，需以生理盐水稀释后再测试，结果再  

乘稀释倍数。