教案

授课内容(章，节)

题 目

第十八章 荧光免疫技术

授课教师单位

广医检验系

教研室

临床免疫检验教研室

职称

主任技师

授课方式

大课面授

授课时数

2

授课对象 检验系2003本科班

授课时间

2006.09.18

授课地点

12-2A

采用教材版本

《临床免疫学检验》吕世静主编

教学目的与要求：

1荧光技术基本原理、荧光基本知识、常用荧光素的特点和

要求。

2荧光抗体技术要点、抗体要求及标记的原理。

3荧光免疫测定方法的分类及原理。

4熟悉内容：荧光显微技术基本原理。

5了解内容：荧光免疫技术的进展。

授课内容(要点)

1 一般讲授荧光的一些基本概念和基本知识：荧光的产生，荧光素的荧光特性，影响荧光的因素，常用荧光素及其特性，合适荧光素的选择 。

2 重点讲解荧光抗体的制备：荧光素与抗体结合，荧光抗体的纯化，荧光抗体的鉴定，学生务必荧光抗体技术要点、抗体要求及标记的原理。

3 一般讲授执业护士网抗原片的制作：临床常见标本，标本的固定目的，常用的固定方法。

4重点讲解荧光免疫测定方法的分类及原理：直接法，间接法，补体结合法的原理。

5 简单介绍荧光免疫技术的其它发展应用：流式细胞仪，荧光偏振免疫分析技术，荧光免疫技术在生物芯片中的应用。

6 重点讲解新发展中时间分辨免疫荧光技术：时间分辨免疫荧光技术基本原理，时间分辨荧光测定的特点、测定技术类型。

7简单介绍荧光免疫技术的最新发展应用：化学发光，上转磷光技术。

时间

分配

2h

讲课重点和难点（采用何种方式或方法来解决)

重点：1荧光抗体技术要点、抗体要求及标记的原理。

2 荧光免疫测定方法的分类及原理。

难点：荧光抗体技术的方法和原理。

采用方式或方法：

1 利用网络资源，学习理解免疫反应的原理。

2 自行制作的动画展现免疫反应的微观世界，让学生加深理解反应原理。

3介绍学生阅读有关参考文献，增加知识面，拓展视野，加深理解，易于记忆。

1)周光炎.免疫学，第六版.北京：人民卫生出版社，2002

2)吴健民.免疫学检验——理论与临床.北京：人民卫生出版社，2003

3)吴世静.免疫学检验，第二版. 北京：人民卫生出版社，2003

教学过程设计：（授课中对以下内容采取的措施)

1．  应用画图解释荧光的产生，荧光素的荧光特性，影响荧光的因素，让学生理解荧光产生的动态过程。

2．  利用表格解释荧光素的选择和各种荧光素的特性。

3．  通过流线图解释荧光抗体的制备过程，在讲授过程中，应详细解释每一步的影响因素与注意事项。

4．  利用直观图、动画等多媒体技术，解释荧光抗体技术的检测原理，本内容是学生撑握的难点，重点要展示微观反应原理。

5．  利用视频技术，展示荧光抗体检测技术的操作过程和检测流程。

6．  采用对比的方法讲解荧光抗体技术中直接法、间接法和补体结合法以及时间分辨免疫荧光技术基本原理，时间分辨荧光测定的特点、测定技术类型。使学生更容易理解各种检测法的特性和应用情况。

7．  简单介绍荧光免疫技术的进展。

2．启发引导学生思维：

1) 标记免疫技术中各种技术的异同点。例如ELISA、放射免疫、荧光免疫和金标记免疫等

2)复习抗原抗体反应、凝聚反应、沉淀反应的特点等基本知识，引导学生回顾学过的知识，提问学生：凝聚反应、沉淀反应的共同点是什么？其检测灵敏度达到什么程度？使学生容易理解标记免疫技术的特点。

3) 学生在充分理解荧光抗体技术的原理及特点基础上，引导学生设计临床测定不同标志物的方法。

3．采用英语专业词汇：

1)  荧光免疫技术 fluorescence Immunoassay

2)  异硫氰酸荧光素 fluorescein isothiocyanate,FITC

3)  四乙基罗丹明 rhodamine B200,RB200

4)  四甲基异硫氰酸罗丹明 tetramethyl rhodamine isothiocyanate,TRITC

5)  藻红蛋白 phycoerythrin,PE

6)  时间分辨荧光免疫测定 time-resolved fluorescence immunoassay,TR-FIA

7)  荧光酶免疫测定 fluorescence enzyme immunoassay,FEIA

4．指导学生自学：

1) 荧光显微镜的使用

2) 荧光抗体技术中抗原的来源及固定方法及对检测的影响。

5．学科进展内容：

1) 荧光免疫技术在生物芯片中的应用和上转磷光技术是免疫荧光技术的新发展，特别是上转磷光技术，目前仅见国外报道，是值得关注的新动向

2) 向学生扼要介绍生物芯片技术和上转磷光技术。

课堂提问设计：

1)  凝聚反应和沉淀反应的特点是什么？检测灵敏度如何？

2)  什么是标记免疫技术？

3)  什么是荧光？什么是荧光素？

4)  荧光素如何与抗体结合？

5)  怎样进行标记荧光抗体的纯化？如何鉴别是否达到纯化要求？

教师与学生互动的设计：

讲授与提问结合，举临床实例说明问题，由浅入深，引导学生，提高学生学习兴趣，调动学生学习积极性。

教学方法与手段（采用何种直观教具和数量)(请打√)

板书设计

1 凝聚反应、沉淀反应：Ag+Ab-----AgAb―――观察

2 标记免疫技术：Ag+Ab*-----AgAb*―――测量*，

或：Ag*+Ab-----Ag*Ab―――测量*，

3 荧光的产生：

  λ2>λ1

幻灯 录像 √CAI课件 √动画  √视频   √网络

其它：

课时具体安排：

1 标记免疫技术概念、分类，荧光免疫技术的概念分类，5min

2 荧光技术基本原理、荧光基本知识、常用荧光素的特点和要求。20min

3荧光抗体技术要点、抗体要求及标记的原理。20min

4荧光免疫测定方法的分类及原理。荧光抗体技术基本原理。20nin

5 时间分辨免疫荧光技术。10min

6荧光免疫技术的进展。5min

教学改革措施（授课形式、课堂提问、思考题、复习提纲、测试题)

1)面授与提问结合，强调须掌握和熟悉的内容，可课后给予思考题及测试题。

2)建议学生上网，通过我们自行制作的网络课件，加深对课程内容的理解。

辅导的问题与难点：

1荧光抗体技术要点、抗体要求及标记的原理。

2www.med126.com 荧光免疫测定方法的分类及原理。

3荧光抗体技术的方法和原理。

备课主要参考资料（图书、文献)：

1)周光炎.免疫学，第六版.北京：人民卫生出版社，2002

2)吴健民.免疫学检验——理论与临床.北京：人民卫生出版社，2003

3)吴世静.免疫学检验，第二版. 北京：人民卫生出版社，2003

授课教师对此次授课的自我评价：

本课是临床免疫检验课程中基础理论的主干课，要求教师有较扎实标记免疫技术理论基础和临床应用经验。此次讲授自己能紧紧抓住荧光免疫技术特点这一主线，重点放在反应原理和临床应用的讲授上。通过多媒体中的图片、动画、视频播放等更形象地展示抗原抗体反应的微观过程，通过彩图及流线图更清晰地讲解荧光免疫的操作过程和影响因素。最后，结合临床经验介绍实际项目的检测（例如CD4检测等)。

讲授过程逻辑性强，条理性好，语言表达清晰，能适当介绍相关的专业英语词汇。在基础理论讲授的同时，向学生介绍有关荧光免疫技术的相关研究，如从FITC荧光素到Eu3+再到自动化仪器中所应用的MuP荧光素的应用，从而扩大学生的知识面。在授课形式上，PPT结合多媒体播放及适当的板书有机的结合，使内容更形象、更生动、更具体，学生更易于理解。

学生评价：

条理清楚,逻辑性强,讲授深入浅出,能将微观难懂的内容讲授得通俗易懂.讲课形式生动活泼,并结合临床实际,使学生更加容易理解.加入新进展内容,扩大知识面。

教研室主任评价：

教案书写要求：文字通畅，书写工整或电脑打印。