广州医科大学检验系
实验带教教案
教研室 | 临床检验基础 | 课程 名称 | 临床检验基础 | 学时 | 4 | 检验专业2005 级 1、2、3班 | ||||
带教时间 | 2008 年3 月13日---2008年 3 月14日 | 教师 姓名 | 斯健会计资格 | 职称 | 主管技师 | |||||
实检(见习)项目 | RBC计数、RBC形态检查、Hb测定 | |||||||||
本次实验 (见习) 目的、 要求 | 1.掌握RBC计数。 2.掌握Hb测定。 3.熟悉RBC形态检查。 | |||||||||
内容与安排 | 学时 | |||||||||
一、介绍本次实验、见习的重点及安排 (实验课应包括:1、实验标本的采集,2、实验操作步骤, 3、实验操作过程注意事项,4、实验结果的评价及临床意义) (一)RBC计数 原理:按一定比例稀释后在镜下计数一定范围内的RBC数 1.器材 显微镜、改良Neubauer计数板、试管、微量吸管、玻璃棒。 2.试剂 红细胞稀释液 3.标本 EDTA盐抗凝静脉血 4.操作 ①加稀释液 取红细胞稀释液2ml加至试管中 ②加血 取EDTA盐抗凝静脉血10ul加至红细胞稀释液中,并用上 清液清洗管腔内残留血液。 ③充池 混匀后用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池,室温平放 3-5min待细胞下沉后显微镜下计数。 ④计数 于高倍镜下计数中间大方格内四角及中央的5个中方格内红细胞总数。 ⑤计算 红细胞/L=N×25/5×10×106×200=1010=N/100×1012 (二)Hb测定 1.器材 分光光度计、玻璃试管、微量吸管、移液管 2.试剂 HiCN转化液 3.标本 EDTA 静脉抗凝血 4.操作 ①红蛋白转化:取HiCN转化液5.0ml,加入全血20ul,混匀后静置5min。 ②比色:波长540nm,光径1.0cm,以转化液作空白,测定标本吸光度A。 ③使用符合WHO标准的分光光度计,根据标本吸光度A直接计算出血红蛋 白浓度。Hb(g/L)=A/44×64458(mg)/1000×251=A×367.7 (三)RBC形态检查(示教) (四)注意事项 1、采血顺利、准确 2、稀释液的选择 3、充池一次完成 4、Hb测定废液的处理 (四)学生分组试验
二、讨论思考题: 1、改良牛鲍氏计数板的结构 2、Hb测定的原理,废液的处理方法?
三、小结要点
1、实验操作情况 2、RBC计数充池前一定要混匀 3、报告方式
四、布置学生作业内容 1、书写实验报告(包括:实验目的、原理、器材和试剂、操作步骤、注意事项、、方法学评价、实验结果、结果分析及结论、讨论) 2、思考题 五、下次实验(见习)课预习范围及后续程介绍
下次实验课内容为:ESR、RET
| 4学时 | |||||||||
教案制定时间: 2008 年 月 日 带教老师签名: | ||||||||||
专业主任审阅意见;
签名: 年 月 日 | ||||||||||