生物化学实验教学大纲(54学时)
课程总学时数: 54 实验学时数 54
面向专业(层次): 药学院、生科院和中药学院
应开实验项目: 6 个(至少包括一个综合实验和一个设计性实验)
应开实验时间: 三 年级 第一 学期
实验类别: 专业基础
一、实验教学目标与基本要求
生物化学是药学专业的重要专业基础课,而实验教学是培养药学人材的一个重要方面,在整个教学计划中占有较大的比重,也是当前本科教学中急需加强的一个环节。本课程旨在培养学生的仪器操作能力、实验动手能力和良好的科研作风,并培养学生实事求是的科学态度、良好的科学素质和工作习惯。为药物的研制、开发和生产培养后备力量。该课程实验内容包括三个部分,即基础生化实验、用于药物研究的生化技术实验和药物作用的生化分析实验。实验类型包括验证性实验、综合性实验、演示性实验和设计性实验。每个实验均包含目的要求、实验原理、实验材料、实验方法及实验指导,涉及凝胶电泳、凝胶层析、生物活性物质的分离纯化和鉴定等实验技能训练。通过实验,加深学生对生物化学基本理论与概念的理解,增强运用所学理论解决实际问题的能力。
基本要求:
1、 通过实验验证理论课中有关的生化基础理论;
2、 熟练掌握生化实验常用的基本方法、技术原理和应用;
3、 了解现代生化实验新技术的原理和应用;
4、 能运用所学的理论和实验知识设计相关的实验研究方案。
二、实验教材及实验指导书:
教材:《生物化学》吴梧桐主编,卫生部规划教材第五版(供药学专业用)
主要参考书:《生物化学实验与指导》 韦平和 主编, 中国医药科技出版社。
三、实验课程内容与学时分配
序号 | 实验项目名称 | 内 容 及 要 求 | 实验学时 | 备注 | |
1 | 蛋白质和酶的性质 | 1.蛋白质的性质(颜色反应, 沉淀反应) 2.酶的性质(酶的特异性, 外界因素对酶活性的影响:温度,pH,激活剂和抑制剂) 3.验证所学的有关蛋白质性质的理论知识 执业护士网4.加深对酶性质的认识 5.掌握氨基酸和蛋白质常用的定性,定量分析的方法和原理 6.掌握检查酶性质的方法及其原理,酶的特异性 | 验证 | 7 | |
2 | 凝胶层析法 (第一次) | 1.掌握分子筛凝胶层析法的工作原理 2.了解使用凝胶介质分离纯化蛋白样品的方法和基本操作技术 | 综合 | 6 | |
蛋白质定量测定 (第二次) | 1. 了解Folin-酚试剂法的操作技术 2. 掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理和方法 3. 掌握分光光度法,包括确定最大吸收波长,制作标准曲线,准确测定未知样品,正确使用测定仪器等 | 6 | |||
凝胶电泳技术 (第三次) | 1. 垂直板状SDS-PAGE电泳分析蛋白的纯度及分子量 2. 掌握垂直板状SDS-PAGE电泳的基本原理 3. 了解垂直板状SDS-PAGE电泳的基本操作,包括制胶、灌胶、加样、电泳、剥胶、染色及脱色等 | 7 | |||
3 | 动物组织中核酸的提取 (第一次) | 1.从猪肝中提取DNA和RNA 2.掌握用盐溶液从动物组织提取核酸的原理和操作技术 | 综合 | 14 | |
核酸的鉴定与含量测定 (第二次) | 1. 掌握核酸常用的定性,定量分析的原理和方法 2. 掌握分光光度法定量核酸的方法 | ||||
4 | 观察四氯化碳中毒性肝炎血清中谷丙转氨酶的活力变化 | 1.测定正常动物血清与四氯化碳中毒动物血清中谷丙转氨酶的活力变化 2.了解四氯化碳对动物的肝毒性 3.了解药物损害肝脏后血清谷丙转氨酶活力的变化 4.掌握血清谷丙转氨酶活力的测定方法 | 验证 | 8 | |
5 | 血清总胆固醇及甘油三酯的测定 | 1.用比色法测定血清中总胆固醇和甘油三酯的含量 2.了解测定血清总胆固醇及甘油三酯的实际意义 3.掌握比色测定血清总胆固醇和甘油三酯的原理及方法 | 验证 | 7 | |
6 | 底物浓度对酶活性的影响 | 1. 测定蔗糖酶的米氏常数,观察底物浓度对酶活性的影响 2. 了解酶促反应动力学研究的范围 3. 掌握测定米氏常数的原理和方法 | 验证 | 7 | |
7 | 蛋白、核酸的区分鉴定及特性常数测定 | 1. 能运用所学知识区分蛋白核酸样品 2. 设计蛋白核酸纯度测定的方法 3. 设计蛋白质分子量等电点等特性常数的测定方法 | 设计 | 8 | |
8 | 多糖样品的纯化,含量测定及特性常数的测定 | 1. 设计运用凝胶层析法纯化多糖样品 2. 运用蒽酮法测定多糖样品的含量 3. 设计方法分析该多糖样品的分子量及单糖组成 4. 设计方法分析该多糖样品的基本结构 | 设计 | 8 | |
9 | 质粒DNA的抽提及琼脂糖电泳 | 1. 了解小量碱法抽提质粒DNA的原理和方法 2. 学习分子生物学的基本实验操作 3. 学习水平琼脂糖电泳分离核酸的方法 | 演示 | 2 | 多媒体演示 |