本方法采用高效液相色谱法测定醋酸甲羟孕酮的含量。

本方法适用于醋酸甲羟孕酮。

供试品用甲醇溶解并稀释成一定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测醋酸甲羟孕酮的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 水（色谱纯)

3. 炔诺酮

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按醋酸甲羟孕酮峰计算应不低于2000，醋酸甲羟孕酮与内标物质峰分离度不低于3.0，主成分前一杂质峰与主成分的分离度应符合要求。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇-水= 70 30

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

1. 对照品溶液的制备

取醋酸加羟孕酮对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释成每1mL中含0.8mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

2. 供试品溶液的制备

取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释成每1mL中约含0.8mg的溶液，精密量取该溶液与内标溶液各2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

3. 内标溶液的配制

取炔诺酮适量，加甲醇制成每1mL中约含0.8mg的溶液，即得。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定，记录色谱图，按内标法以峰面积计算其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p841。