本方法采用分光光度法测定驻车丸中总生物碱（以盐酸小檗碱计算)的含量。

本方法适用于中成药驻车丸。

供试品经盐酸-甲醇（1:100)回流提取后，取一定量置中性氧化铝柱净化，收集乙醇洗脱液，取一定量加0.05mol/L硫酸溶液定容。置紫外可见分光光度计, 于波长345nm处测定吸收度，以盐酸小檗碱（C₂₀H₁₇NO₄•HCl)的吸收系数（E1% 1cm)728计算总生物碱含量。

1. 盐酸

2. 甲醇

3. 硫酸(0.05mol/L)

4. 氧化铝柱 (内径0.9cm，中性氧化铝5g，湿法装柱，用30mL乙醇预洗)

1. 紫外-可见分光光度计

2. 索氏提取器

供试品溶液的制备

取供试品，过三号筛（50目)，精密称取2g,置索式提取器中，加盐酸-甲醇（1:100)适量，加热回流至提取液无色，提取液移至50mL量瓶中，用盐酸-甲醇（1:100)稀释至刻度，摇匀。精密量取5mL照柱色谱法置氧化铝柱上，用乙醇25mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。

注：“柱色谱法”系指色谱柱为内径均匀，下端缩口的硬质玻璃管，下端用棉花或玻璃纤维塞住，管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀，以保证良好的分离效果。

湿法装柱：将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整。

供试品的加入：将供试品溶液沿管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。

供试品的测定

精密量取供试品溶液2mL，置50mL量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在345nm波长处测定吸收度。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在０.３－０.７之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p.513。