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丁公藤—总东莨菪内酯的含量测定—HPLC法
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方法名称:
  丁公藤—总东莨菪内酯的含量测定—HPLC法
应用范围:
  测定丁公藤中总东莨菪内酯的含量
方法原理:
 本品粉末加乙醇回流提取,加3mol/L盐酸溶液加热水解,氯仿萃取后经液相色谱仪分离,在310nm处测定峰面积,外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  日本岛津LC-6A高效液相色谱仪,CR4-AX数据处理机,SPD-6A紫外检测器;

色谱条件  色谱柱:日本岛津CLC-ODS1(6mm×150mm,5μm)色谱柱,日本岛津CLC-ODS1(6mm×10mm,5μm)保护柱;流动相:0.5%冰醋酸甲醇-水(26:55);流速:0.9mL/min;柱温:50℃;检测波长:310nm;内标:丙酮;记录仪衰减4;纸速:4mm/min;进样量:20μL。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  精密称取东莨菪内酯对照品50mg50mL量瓶中,加甲醇定容。精密吸取4mL,置10mL量瓶中,加丙酮1mL,甲醇定容,避光冷藏。

供试品溶液的制备  精密称取样品粗粉约1g(过60目筛),加乙醇150mL,加热回流8h,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2mL溶解,移置20mL具塞试管中,水浴中挥干,残渣加盐酸(3mol/L)10mL溶解,水浴中水解3h,取出放冷,移置分液漏斗中,容器用水适量洗涤3次(10,5,5mL),加氯化钠2g溶解,氯仿提取4次(每次10mL),合并提取液,加无水硫酸钠1g,静置1h以上,滤过,滤液挥干,残渣加甲醇2mL溶解,移入10mL量瓶中,甲醇洗涤容器并稀释至刻度,避光冷藏。
操作步骤:
  按供试品溶液的制备方法制备,分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各20μL,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  李梅,陆敏仪.HPLC法测定丁公藤中总东莨菪内酯量.中国中药杂志.1999.24(1):41-43,64
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