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冬虫夏草发酵液冻干粉—虫草素和腺苷的含量测定--HPLC法
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方法名称:
  冬虫夏草发酵液冻干粉—虫草素和腺苷的含量测定-- HPLC法
应用范围:
  测定冬虫夏草发酵液冻干粉中虫草素和腺苷的含量
方法原理:
 冬虫夏草发酵液冻干粉加入90%甲醇回流提取,经液相色谱仪分离,在260nm测定峰面积,标准曲线法测定虫草素和腺苷的含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  日本岛津高效液相色谱系统( SHIMADZU LC-10ATvp 、紫外检测器SHIMADZU SPD-10Atvp、柱温箱(天津奥特赛恩斯AT-330);

色谱条件 色谱柱:反相DIAMONSIL C18 烷基硅胶柱(250mm ×4.6mm,5μm);检测波长:260nm;流速:1.0 mL/min;柱温:40℃;流动相:乙腈+水+甲醇= 2+85+2。
试样制备:
 

虫草素标准曲线的制备 精密称取2.25 mg虫草素对照品,90%甲醇定容至25mL,然后用90 %甲醇分别稀释成0.451.264.509.0013.5018.00μg/mL系列对照溶液,分别取以上不同浓度的对照溶液准确进样5μL,以峰面积对溶液浓度进行回归,即得。

腺苷标准曲线的制备 精密称取2.20mg腺苷对照品,90%甲醇定容至25mL,然后用90 %甲醇分别稀释成1.764.408.8013.5017.60μg/mL系列对照溶液,分别取以上不同浓度的对照溶液准确进样5μL,以峰面积对溶液浓度进行回归,即得。

供试品溶液的配制 精密称取0.5g冬虫夏草发酵液冻干粉,置磨口锥形瓶中,加入20mL90%甲醇,水浴回流2h,抽滤,残渣用90%甲醇洗涤3次,将滤液合并浓缩,90%甲醇定容至5mL容量瓶中,即得。
操作步骤:
  依供试品溶液的制备方法,制得供试品溶液,注入高效液相色谱仪,按上述色谱条件测定,计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  王海霞,胡高升,蒙娅等.RP-HPLC 法测定冬虫夏草发酵液冻干粉中虫草素和腺苷含量.中国食品卫生杂志.2007,19(4):309-312
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