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含冬虫夏草制剂--虫草川贝止咳膏--腺苷的含量测定--HPLC法
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方法名称:
  含冬虫夏草制剂--虫草川贝止咳膏--腺苷的含量测定 -- HPLC法
应用范围:
  测定虫草川贝止咳膏中腺苷的含量
方法原理:
 样品加90%甲醇超声提取,中性氧化铝柱净化后经液相色谱仪分离,在260nm测定峰面积,标准曲线法测定腺苷含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  美国热电公司TSP高效液相色谱仪(UV6000二极管阵列检测器、ChromQuest色谱工作站、P4000输液泵);

色谱条件 色谱柱:北京迪马科技有限公司C18柱(250mm×4.6mm,5μm);柱温:室温;流动相:pH6.5磷酸盐缓冲液(取0.01mol/L磷酸二氢钠68.5mL与0.01mol/L磷酸氢二钠31.5mL,混合)-甲醇(17:3);流速:1.0mL/min;检测波长:260nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  精密称取腺苷对照品5.61mg25mL量瓶中,加90%甲醇稀释至刻度,摇匀,再精密量取此溶液1mL5mL量瓶中,加90%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得44.88μg/mL的对照液品储备溶液。精密量取上述储备溶液5mL10mL量瓶中,加90%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得22.44μg/mL的对照品溶液。

供试品溶液的制备  取本品,研细,精密称取8g,置锥形瓶中,精密加入90%甲醇50mL,密塞,称重,超声处理30min,放冷,再称重,用90%甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液25mL,蒸干,残渣加90%甲醇10mL使溶解,装入中性氧化铝柱(100-200目,10g,内径1.5cm,干法装柱),用70%甲醇100mL洗脱,收集洗滤液,蒸干,残渣加90%甲醇使溶解,转移至10mL量瓶中,加90%甲醇至刻度,摇匀,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取对照品溶液5μL与供试品溶液20μ L,注入高效液相色谱仪,在色谱条件下测定腺苷含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  海学武,强茂,高慧萍等.高效液相色谱法测定虫草川贝止咳膏中腺苷的含量.药物分析杂志.2004,24(2),210-212
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