方法名称： |
莲须—槲皮素—HPLC |
应用范围： |
本方法适用于莲须中槲皮素含量的测定 |
方法原理： |
本品加甲醇回流提取，再用醋酸乙酯提取，经液相色谱分离，在370 nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器 LC-6A高效液相色谱仪（日本岛津)：SPD26AV可见-紫外检测器，C-R3A色谱数据处理机；SIL-6A 自动进样器 色谱条件 色谱柱：Shim-pack CLC-ODS（6.0 mm×150 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0.025 mol/L磷酸（60∶40)；流速：1.0 mL/min；柱温：25℃；检测波长：370 nm |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称定槲皮素对照品10.90 mg，置50 mL量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度精密吸取5.0 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，使对照品溶液浓度为0.0218 mg/mL。 供试品溶液制备 取药材粗粉（过40目筛)1 g，精密称定，加甲醇50 mL回流2 h，立即过滤，滤渣加甲醇30 mL回流提取1 h，滤过，合并滤液，水浴蒸干，残渣加水10 mL溶解，转移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提取5次（30，30，15，15，15 mL)，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转至25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，备用。 |
操作步骤： |
分别精密吸取槲皮素对照液以及莲须供试品溶液适量，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算槲皮素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
孟宪生，沙明，曹爱民等.HPLC法测定莲须中槲皮素和山萘酚的含量.中成药. 2003. 25（12)： 1004～1006 |
