方法名称: |
济银花与川银花—绿原酸的含量测定—HPLC |
应用范围: |
本方法适用于济银花与川银花中绿原酸含量的测定 |
方法原理: |
本品药材加乙醇回流提取,提取物加甲醇超声提取,经液相色谱分离,在326 nm处测定峰面积,外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件: |
仪器 235C2250高效液相色谱仪,美国PE公司生产 色谱条件 色谱柱:瑞典kromasil C18 (5 μm,250 mm ×416 mm);流动相:甲醇-水(15∶85) (内含0.2 mol/L磷酸二氢钠,磷酸调pH为3.2);检测波长:326 nm |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇溶解并制成每1 mL含0.02 mg的溶液,即得。 供试品溶液制备 1)金银花药材供试品溶液的制备:取金银花4 g,精密称定,加乙醇100 mL,水浴加热回流1 h,如此提取二次,滤液合并于200 mL量瓶中,冷却,加乙醇至刻度,摇匀。精密量取此液1 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。2)金银花提取物供试品溶液的制备:精密称取本品粉末约10 mg,加甲醇45 mL,超声处理2 min,滤过,用少许甲醇洗涤,置50 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。 |
操作步骤: |
分别精密吸取绿原酸对照液以及金银花药材、金银花提取物供试品溶液10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算绿原酸含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
冯文宇,田吉,何兵. 济银花与川银花绿原酸含量及提取率实验研究. 中药材. 2006,29(1):30~31 |