采用间接ELISA方法检测胃十二指肠疾病患者血清中抗幽门螺杆菌(Hp)抗体IgG,以检测各型胃、十二指肠疾病患者的Hp感染情况,并对检测结果与细菌培养和/或涂片(培养30例,涂片48例)进行分析对比。本文探讨了胃炎、胃及十二指肠溃疡病患者血清抗Hp抗体IgG测定的临床应用价值。
1 对象和方法
1.1 对象
浅表性胃炎患者17例,萎缩性胃炎患者8例,胃溃疡患者14例,十二指肠球溃疡患者12例。全部病例均经临床、病理诊断确诊。血液标本采取后立即分离出血清置-20℃冻存备检。
1.2 方法
抗Hp抗体IgG检测用ELISA试剂。所用包被用Hp抗原、正常阴性对照血清、辣根过氧化酶标记的羊抗人IgG结合物均由上海第二医科大学提供。采用ELISA间接法,按提供试剂单位制定的抗Hp抗体IgG检测程序进行。方法简述如下:用10μg/ml的抗原(多株Hp超声粉碎物)包被聚苯乙烯反应板,0.1ml/孔,4℃过夜。用10www.med126.com/yishi/%牛血清磷酸缓冲液(pH7.4)封闭37℃1h。加待检样品为稀释度1:200的病人血清,37℃结合2h。加辣根过氧化酶标记的羊抗人IgG抗体37℃孵育。最后加邻苯二胺作基质,2M硫酸手反应终止剂。每加一层试剂时用0.05%PBSTWeen20(pH7.4)洗涤3次。显色后用DG—3022型酶联仪在490nm波长测定OD值,标本OD值与血清中抗体IgG量呈正相关,以标本OD值比阴性对照OD值(每板设两孔以上,取平均值),大于1.70者为血清抗Hp抗体IgG阳性。
2 结果
浅表性胃炎17例中,血清抗Hp抗体IgG阳性12例(70.6%),萎缩性胃炎8例中,阳性5例(62.5%),胃溃疡14例中,阳性12例(85.7%),十二指肠球溃疡12例中,阳性11例(91.7%)。本组51例中ELISA法检测阳性40例(78.4%),培养和/或涂片检测阳性39例(76.5%),二者无明显差异(P>0.05)。
2 讨论
至今为止,慢性胃、十二指肠疾患的病理机制尚未完全明确。现在多数学者认为幽门螺杆菌的感染与慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡的发病有关。Hp的致病性存在于:①Hp能分泌尿素酶,将尿素分解为氨;氨对粘膜具有毒性。②Hp细胞毒,能使胃粘膜上皮细胞空泡变性。③Hp与胃上皮有特别亲和力,粘附于细胞表面。④Hp尿素酶,可破坏胃粘液,导致粘液性改变,H+反弥散。⑤Hp分泌脂酶A,能分解胆盐,后者对胃粘膜有毒性。⑥Hp内毒素。⑦Hp感染致使胃体部腺粘膜PAS—AB阳性物质减少,尤以幽门腺区域的粘膜表层细胞内粘蛋白降低为显著,致粘膜防御机制减弱,从而有引起胃溃疡的可能性。上述原因可异致灶部粘膜炎细胞www.med126.com浸润、粘膜上皮细胞水肿、充血、粘液增多变性;还可伴有血及糜烂,从而引起炎症及溃疡。
国外已有报道血清抗Hp抗体的IgG的测定结果与Hp菌的粘膜检出结果间有很好的相关一致性。本文检出结果与上述报道一致。血清抗Hp抗体IgG的测定是判断胃炎、消化性溃疡疾患者有无Hp感染的良好指标。已有报道表明血清抗Hp抗体IgG当Hp清除后可以转阴。本文测定结果表明,ELISA法测定血清抗Hp抗体IgG结果与粘膜活检的细菌培养和/或涂片结果之间无显著差异,且方法简便,不需做胃镜检查。血清抗Hp抗体IgG测定对临床诊断有无Hp感染及胃、十二指肠疾患者抗菌药物的使用、疗效观察有一定的临床价值。