2、试剂
⑴ 1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000ml医,学.全,在.线www.med126.com；
⑵ 2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000ml；
⑶ 维生素C尺度液：切确称20mgVC溶于1%草酸中，并稀释至100ml，吸5ml于50ml容量瓶中，插手1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有0.02mgVC；
⑷ 0.02%2，6-二氯靛酚溶液：称取2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml含有52mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至250ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内，应用过程中每礼拜标定一次。
标定一：吸标液（VC)5ml于三角瓶→加6%KI溶液0.5ml→加1%淀粉3滴→用0.001N KIO3标液滴定到淡兰色。
计较：
抗坏血酸浓度（mg/ml)= （V1 × 0.088)/ V2
V1 - 滴按时耗损0.001N KIO3标液的体积（ml)
V2 -维生素C重量（g)
0.088 -1ml0.001N KIO3标液≈维生素C的量（mg/ml)
标定二：吸5ml已知浓度V C标液 → 加5ml1%草酸 → 用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉红色，在15秒不褪色为终点
计较：每毫升2，6-二氯靛酚相当于维生素C的毫克数等于滴定度（T)
T= （C × V1)/ V2
C - 维生素C的浓度（mg/ml)
V1 -维生素C的体积（ml)
V2 -耗损2，6-二氯靛酚的体积（ml)
⑸ 0.001N KIO3标液：吸0.1N KIO3溶液5ml→于500ml容量瓶内→加水至刻度，每毫升相当于VC0.008mg；
⑹ 0.5%淀粉溶液；
⑺ 6%KI溶液；
3、操作体例
⑴ 提取：称样50g→加2%草酸100ml→到入捣碎机中→措置→过滤→颜色若深可加白陶土来历：
⑵ 滴定：吸5ml样液→于三角瓶→用染料滴定至粉红色→15秒内不褪色
计较：
VC（mg/100g)=（V × T)/ W × 100
V -耗损染料体积（ml)
T -1ml染料所能氧化维生素C的毫克数
W- 滴按时所有滤液中含有样品的克数
4、注重事项
⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；
⑵ 滴按时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为不雅察看颜色转变的参考；
⑶ 样品进入尝试室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失踪维生素C；
⑷ 贮存过久的罐头食物，可能含有大量的低铁浪子（Fe2+)，要用8%的醋酸庖代2%草酸。这时如用草酸，低铁浪子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高医,学,全,在,线,提,供www.med126.com，使用醋酸可以避免这种情形的发生；
⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；
⑹ 在措置各类样品时，如遇有泡沫发生，可插手数滴辛醇消弭；
⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。
二、2，4-二硝根基肼法
可测总抗坏血酸，总抗坏血酸搜罗还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸型。此法是将样品的还原型抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸，然后与2，4-二硝根基肼浸染，生成红色的脎。脎的量与总抗坏血酸含量成正比，将红色脎溶于硫酸后进行比色，由尺度曲线计较样品中总VC。
1、事理：
用酸措置过的活性碳把还原型的抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸，在继续氧化为二酮古乐糖酸。
二酮古乐糖酸与2，4-二硝根基肼偶联生成红色的脎，其成色的强度与二酮古乐糖酸浓度呈正
比，可以比色定量。
2、轨范
⑴ 样品措置与剖析
称必然样 → 加等量2%草酸 → 于高速捣碎机捣碎 → 取匀浆20g → 用1%草酸定容100ml → 过滤 → 取滤液10ml → 加1%草酸10ml → 加少量活性炭 → 摇1分钟 → 静置过滤 → 各取滤液2ml于样品管和样品空白管 → 各管插手1滴硫脲溶液 → 于样品管中插手2医,学.全,在.线www.med126.com，4-二硝根基肼0.5ml → 分袂于两个管加盖 → 于37℃保温箱3小时 → 掏出后样品管放入冰水中 → 样品空白管掏出后冷至室温 → 在样品空白管插手2，4-二硝根基肼 → 0.5ml → 样品管和空白管都于冰浴中 → 滴加85%H2SO42ml于各管中 → 边滴边摇 → 防止温度升高炭化后呈黑色 → 冰浴中30分钟后掏出 → 室温下放置30分钟后，在540nm测消光值，从尺度曲线上查出响应的含量
⑵ 尺度曲线的绘制
取5个50ml容量瓶编号 1 2 3 4 5
加VC标液0.2mg/ml 10 20 30 40 50ml
取5个比色管取响应 2 2 2 2 2
加硫脲溶液（滴) 1 1 1 1 1
2，4-二硝根基肼（ml)0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
于37℃保温箱3～4小时，掏出于冰浴中，然后滴加85%硫酸2.5ml→掏出放30分钟→在540nm下测各消光值绘尺度曲线，同时做空白。
计较：每百克食物中抗坏血酸的毫克数=C/W *100
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