课程名称

临床免疫学检验

授课题目（章节或主题)

免疫细胞的分离与检测

授课教师

王慧

所属二级学院

第一临床学院

所属教研室

检验系临床免疫

职称

讲师

授课时间

2006 年10月 16 日第7 周星期一 第6-7 节第1 次课

授课时数

2学时

授课班级

  医学  检验 专业（本科√□ 专科□)   2003   级 1、2、3  班

教学课型

理论课√□ 实验课□ 习题课□ 讨论课□ 实习（践)课□  其它□

教材名称、作者、出版社及出版时间

<临床免疫学检验>，吕世静主编，中国医药科技出版社，2004年

教学目标与要求：

1、  掌握内容：外周血单个核细胞分离的原理及操作要点，淋巴细胞的纯化与亚群分离，T细胞的特异性抗原的检测，T细胞增殖试验，B细胞功能的检测(溶血空斑试验、酶联免疫斑点法)。

2、  熟悉内容：吞噬细胞的分离，细胞的保存技术胸、细胞活力测定，T、B细胞数量的检测，T细胞介导的细胞毒试验，T细胞体内试验，B细胞功能的检测(体内试验、增殖试验)

3、了解内容：NK细胞功能的检测，吞噬细胞功能检测

主要知识点、重点与难点：

主要知识点：

一、免疫细胞的分离与纯化：采用何种分离方法，应根据实验的目的及所需细胞的种类、纯度及数量等要求来确定。

1、  白细胞的分离:自然沉降法，聚合物加速沉淀法

2、  外周血单个核细胞 的分离：Ficoll、Percoll分层液法

3、  淋巴细胞的纯化：红细胞的去除，血小板的去除，单核细胞和粒细胞的去除(粘附贴壁法，吸附柱过滤法、羰基铁粉吞噬法)

4、 淋巴细胞亚群的分离：E花环分离法，尼龙棉柱分离法，亲和板结合分离法，免疫磁珠分离法

5、  吞噬细胞的分离和收集

6、  淋巴细胞的保存

二、T细胞数量的检测：T细胞表面主要CD抗原的检测(间接免疫荧光法，酶免疫组织化学法， 微量细胞毒试验， 花环技术)

三、B细胞数量的检测：mIg的检测，CD抗原检测，Fc受体和补体受体的检测，小鼠红细胞受体的检测

四、T细胞功能的检测：T细胞增殖试验(形态法，同位素计数法，MTT比色法)，T细胞介导的细胞毒试验，体内试验

五、B细胞功能的检测：体内试验，B细胞增殖试验，溶血空斑试验，酶联免疫斑点法

二、重点：

1 、 免疫细胞分离及检测的原理；

2 、 免疫细胞活力的检测及保存

3、 细胞增殖试验

三、难点：

1、密度梯度离心法的原理

2、溶血空斑试验

教学方法（请打√选择)：

讲授法□√　 讨论法□ 　演示法□　 自学辅导法□　 　练习法(习题或操作) 　读书指导法□

ＰＢＬ（以问题为中心的教学法)□√　　案例法□　 其他□

教学媒体（请打√选择)：

教材□√ 板书□√ 实物□  标本□  挂图□ 模型□ 投影□√ 幻灯□   录像□   CAI（计算机辅助教学)□

教学过程设计（包括讲授内容、讲授方法、时间分配、媒体选用、板书设计等)：

1、概述 (3分钟)

免疫细胞检验-反应机体细胞免疫功能 ，免疫细胞的分类（图示)。

2、第一节  免疫细胞的分离与纯化（掌握)（35min)

（一)白细胞的分离（图示+讲授法－一般讲授)

（二)外周血单个核细胞的分离（图示+讲授法－重点讲授)

（三)淋巴细胞的纯化与亚群分离（讲授法－重点讲授)

（四)吞噬细胞的分离（讲授法－一般讲授)

3、第二节  淋巴细胞数量检测（熟悉)(16min)

（一)T细胞数量检测（讲授法－重点讲授)

（二)B细胞数量检测（讲授法－重点讲授)

4、第三节  淋巴细胞功能检测（熟悉)(20min)

（一)T细胞功能检测（图示+讲授法www.med126.com/wsj/－重点讲授)

（二)B细胞功能检测（讲授法－重点讲授)

（三)NK细胞功能检测（讲授法－一般讲授)

5、第四节  吞噬细胞功能检测（自学)

（一)中性粒细胞功能检测

（二)巨噬细胞功能检测

6、总结概括本堂内容

提问、课堂讨论等师生互动的设计：

1、  什么是免疫细胞？（显示电镜图片，吸引学生学习的兴趣)

2、  免疫细胞的功能？

3、  为什么要进行免疫细胞的分离？

4、  为什么分离外周血单个核细胞的最佳密度为1.077±0.001？

教学小结、复习思考及作业题布置：

归纳、概括本堂学习的重点，布置课后思考题

1、试述外周血单个核细胞的分离方法？

2、试述T、B细胞数量检测技术类型？

3、试述T、B细胞功能检测技术原理与类型？

教学中的创新点（加强基础与临床联系、外语运用、启发学生思维、指导学生自学、介绍学科新进展等方面)：

1、课程一开始采用几种电镜图片引起学生学习的兴趣

2、所有专业名词均用英文标注，并在讲授过程中用英文念出该专业名词。

3、第四节课内容安排学生进行自习，培养学生自学的能力。

参考资料（包括辅助教材、参考书、文献等)：

《临床免疫学和免疫学检验》人卫出版社 第三版 王兰兰主编 

《免疫学和免疫学检验》人民卫生出版社 第二版 陶义训主编

《微生物学及微生物学检验》  唐珊熙 主编  2002年人卫出版社

教研室

意 见

教研室主任签章： 年　　月　　日

教学后记（即教学实施情况总结分析，在课程结束后填写)