雏番鸭小鹅瘟如何进行实验室诊断?
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(1)免疫焚光抗体检査无菌采集病鸭的肝、脾、肾、脑， 将病料按常规用冰冻切片机切成5微米厚的组织片，贴于载 玻片上，干燥后用丙酮固定12分钟，将载玻片放入37°C水浴 箱中的染色架上，在组织切片上滴加荧光抗体，染色30分钟 取出。先用0. 01摩尔/升磷酸盐缓冲液(PBS,pH值8. 0)水 洗20分钟，再用蒸馏水水洗3次，每次10分钟，干燥后用荧光显微镜镜检。在放大200倍的视野中，可见切片上黑色的 胞核中或其边缘有一个或数个针尖大小的清晰明亮黄绿色特 异荧光，而核以外的组织则为黄红色或红色。(2) 病毒分离鉴定① 病料的处理无菌采集病死鸭的肝脏、脾脏，剪碎研 磨，用灭菌生理盐水制成悬液，比例为1 : 5,经3 000转/分离 心30分钟，吸取上清液，每毫升加人
青霉素、
链霉素各1 000 国际单位处理，置于冰箱内冻结保存，作病毒分离的接种材 料。② 病毒分离取以上处理好的病料，接种于12?15日龄 的鹅胚绒毛尿襄腔内，每鹅胚接种0.5毫升，置于37°C的温 箱孵育。每天照蛋，及时收集48?72小时死亡的鹅胚，置于 4°C?8°C的冰箱中冷冻4小时后，无菌收集上清的尿囊液，过 滤细菌，保存。剖检死鹅胚，可见绒毛尿囊腔
水肿，全身皮肤 充血、出血和水肿，即可确诊。③ 动物回归试验试验组：取上述病料的上清液和按 1 : 10稀释的鹅胚绒毛尿襄液，分别接种7?10日龄的雏鹅 各5只（或5?10日龄的雏番鸭)，0? 2毫升/只。空白对照组:取无菌生理盐水肌注7?10日龄的雏鹅5 只（或5?10日龄的雏番鸭)，0.2毫升/只。试验组与对照组 隔离词养。如果试验组雏鹅(雏番鸭)发病死亡，且其临床症状和剖 检病理变化与鸭小鹅瘟自然发病的病鸭相似，而对照组的雏 鹅(雏番鸭)不出现任何症状，即可确诊为小鹅瘟。(3) 血清学诊断①动物保护试验试验组:取抗小鹅瘟高免血清肌注5日龄左右的雏鹅5只(或5日龄左右的雏番鸭)，1. 5?2毫升/只。6小时后注射 上法收集的按1 : 10稀释的鹅胚绒毛尿囊液，〇. 1毫升/只。对照组:取无菌生理盐水肌注5日龄左右的雏鹅5只(或 5日龄左右的雏番鸭)，6小时后用病毒分离收集的鹅胚绒毛 尿囊液，按1 : 10比例稀释后注射，〇. 1毫升/只。如果试验组雏鹅(雏番鸭)80%以上得到保护，而对照组 80%以上发病死亡，且其临床症状和剖检病理变化与鸭小鹅 瘟自然发病的病鸭相似，即可确诊为小鹅瘟。鸭小鹅瘟血清学诊断方法还有中和试验、琼脂扩散试验、 ELISA 等。
