鹅巴氏杆菌病的确诊方法有哪些?
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(1)微生物学检验采取疑似巴氏杆菌病鹅的心血、肝、脾、肾等有病变的内脏器官作为被检病料。染色镜检：被检病料做触片或涂片，待自然干燥后用火焰固定，美蓝染色或瑞氏、姬姆萨染色镜检，如见两极染色卵圆形的小杆菌，或革兰氏染色，镜检见有革兰氏阴性、大小一致、卵圆形的小杆菌，可初步确诊。分离培养：将被检病料接种于
绵羊鲜血琼脂培养基，或马丁氏琼脂培养基，或血清琼脂培养基等平皿，于37℃温箱作用24小时，取其中细小、半透明、圆整、淡灰色、光滑的菌落接种于鲜血斜面培养基，供涂片镜检、生化反应、动物接种、血清学检验用。(2)动物接种将被检鹅的心血或肝脏、脾脏磨细，用灭菌生理盐水做1：5～1: 10稀释，或将24小时斜面纯培养物加入5～10毫升灭菌生理盐水洗下，作为接种材料。青年鹅皮下或肌肉注射0.5—1．O毫升，或静脉注射o．5毫升，或滴鼻0．1～0.2毫升，接种后于24～48小时死亡，剖检见有典型鹅巴氏杆菌病病理变化即可确诊。小白
鼠皮下或腹部注射0.2～o．5毫升，于24～48小时死亡，剖检内脏器官呈
败血症病理变化。(3)抗原型鉴定荚膜物质(K)抗原型鉴定：将被鉴定菌株接种于马丁氏琼脂斜面培养基，于37℃温箱作用24小时，用2～3毫升灭菌生理盐水洗下，并收集于小试管中，置于56℃水浴箱中30分钟，促进荚膜物质由菌体上解脱下来，然后经6 000～8 000转／分，离心30～60分钟，上清液即为所制备的荚膜抗原。取被检菌株荚膜抗原约0.3毫升，加入经福尔马林固定的0.2毫升洗净的绵羊红胞，充分混合后置37℃温箱或水浴箱中作用1～2小时。然后经3 000转／分，离心30分钟，弃上清液，沉淀红细胞，再用约10毫升生理盐水洗一次红细胞，除去游离的未被红细胞吸附的荚膜抗原。离心收集的致敏红细胞，加入20毫升生理盐水，配制成1%的致敏红细胞悬液。各取1%的致敏红细胞悬液0.5毫升，分别加入1: 40稀释的各型抗血清(A、B、D、E、F)0.5毫升于试管内，摇动试管，使之混合均匀，放置于室温中2小时或37℃温箱作用1小时后观察。阳性者红细胞呈凝集现象，阴性者红细胞集中于试
管底部。判定结果的方法与一般红细胞凝集反应相同，通常以++号为标准。菌体(O)抗原型鉴定；将被鉴定的菌株接种于马丁氏琼脂斜面或克氏瓶，37℃温箱作用24小时，每个斜面加入l毫升，每个克氏瓶加入20毫升含8. 5%
氯化钠、0.02摩／升的磷酸缓冲液洗下苗苔，收集于试管中，置100℃水浴箱内1小时，然后经6 000～8 000转／分，离心30分钟，弃上清液，将沉淀物加入等量的缓冲液，并加入福尔马林防腐，作为被检“O”抗原。保存于冰箱内备用。用8.5%氯化钠盐水配制的0.9%琼脂糖或琼脂浇入平板或玻璃板上，使其厚度为3～3.5毫米。凝固后用打孔器打孔，孔径一般为4毫米，孔距为6毫米，中心孔加入被榆抗原，周围孔加入标准血清，于37℃温箱放置24～48小时。阳性者抗腺孔与抗体孔之间出现白色沉淀带。(4)血清学检验血清学诊断的目的，在于应用血清学的凝集方法对鹅群进行普查诊断和免疫效果的检测。用标准A型、B型、D型、E型、F型5型菌株，或当地分离的菌株按上述介绍方法制备成1%的致敏绵羊红细胞作为诊断抗原。试管法：将待检
鹅血清做成不同稀释度，分别加入等量诊断抗原，摇匀后放置于室温中2小时或37℃温箱作用1小时观察。凝集价在1：40以上者为阳性反应。玻片法：取被检血清0.1毫升（约2滴)滴于玻片上，随后加入等量诊断抗原，于15～20℃下摇动玻片，使抗原与被检血清均匀混合，1～3分钟内出现絮状物，液体透明者为阳性。
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通过细菌分离培养
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实验室检测
