水禽网状内皮组织增生病的确诊方法有哪些?
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(1)病毒分离①病料采集。采集病变组织或
肿瘤、血浆和泄殖腔拭子,作为病毒分离材料。②病料处理。病变组织或肿瘤病料剪碎、磨细,用灭菌生理盐水做1:5稀释,经3 000转/分,离心30分钟。取上清液加入
青霉素、
链霉素使之每毫升各含1 000单位。经细菌检验阴性者,为病毒分离材料。取血浆上层黄血浆和中间层白细胞,经高速离心取沉淀物,用含有各1 000单位青霉素、链霉素灭菌生理盐水做1:3~1:5稀释,经细菌榆验阴性者为病毒分离材料。将采集的棉拭子浸泡于含有各2 000单位青霉素、链霉素灭菌生理盐水于室温作用60分钟。经3 000转/分,离心30分钟,取上清液经细菌检验阴性者,为病毒分离材料。③细胞接种。除病毒分离材料接种于鸭胚肾单层细胞或鸭胚成纤维细胞,感染后细胞一般不会产生细胞病变,每代培养7天,当细胞液变黄色时需换细胞培养液。需至少
盲传二代以上。应用特异性荧光抗体试验、PCR等方法对病毒进一步鉴定。(2)血清学诊断方法 一般用病毒中和试验、琼脂扩散试验、酶免疫测定、PCR等方法鉴定分离株的抗原和感染禽血清f或卵黄中的抗体。
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血清学诊断
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实验室检测确诊