微 信 题 库 搜 索
理论教学
内科学
风湿病学 神经病学 免疫与健康
儿科学 老年医学 更多
外科学
皮肤性病学 普通外科学 烧伤外科学
神经外科学 外科学总论 更多
其它科目
基础学科 临床专科 内科疾病
内科诊疗 外科诊疗 专科诊疗
外科疾病 专科疾病 临床专科疾病
 医学全在线 > 理论教学 > 基础学科 > 免疫细胞与核酸分子杂交 > 正文
原位杂交组织化学常用试剂及处理
来源:医学全在线 更新:2007/12/3 字体:

 

  4.Dig标记探针杂交后处理液

  用ddH2O溶液并定容至1000ml。

  用ddH2O溶解并定容至1000ml。

  配制同上。

  左旋咪唑有消除内源性磷酸酶的作用。

  九、原位杂交信号显示

  目前应用原位杂交方法中,信号的显示主要有放射自显影,酶底物及免疫金银等方法,在此归纳有关的主要试剂。

  1.A-B显影液

  称取上述试剂,按配方分别溶于50ml ddH2O中,于显影前,在室温将两者(A液及B液)按1:1混合,稍加摇动促进混合,即可将贴有切片标本的切片放入显影液,于室温避光(可暗室)反应5~15min。显影时间和温度相关,需自己根据情况摸索。终止反应只需将显影液倒出,自来水冲洗即可。倒出的AB显影液可暂时不扔,光镜下观察,若明显显影不够,还可重新或继续显影。AB显影液要求临用前配制,在显影时才将AB二液混合。否则,A液过久会产生黄色沉淀,增加背景。

  AB液用于免疫金银法中,使金标记颗粒信号放大,形成棕黑色沉淀。

  2.DAB-H2O显色液

  配制方法见附录一。

  该液用于标本被标记上辣根过氧化物酶(HRP)的方法。产物为棕黄色。

  3.NBT-BCIP显色液

  配制方法,详见附录一。

  该液用于有碱性磷酸酶标记物的方法中。产物为紫蓝色。

  4.Kodak D-19显影液

  配制:先将500ml水中加温50℃,按上述配方顺序加药,同时充分搅拌,每加一种药完全溶解后,再加另一种药品,否则,所配的显影液易产生混浊而效果差,最后补足水至1000ml充分混合,室温或4℃避光保存。最好包上纸。

  该液用于放射自显影时的显影。

  5.Kodak F-5定影液(酸性坚膜定影液)

  ※:28%醋酸为3份冰醋酸和8份水混合液。

  配制:同Kodak D-19显影液。

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8]  下一页

相关文章
9-2 原位辅助性肝移植
原位杂交技术在染色体铺片的应用
原位分子杂交技术在电镜水平的应用
cRNA探针在原位杂交组织化学(ISHH)中的应
DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的
   触屏版       电脑版       全站搜索       网站导航   
版权所有:医学全在线(m.med126.com)
   触屏版       电脑版       搜索   
版权所有:医学全在线(m.med126.com)
网站首页
频道导航
医学论坛
返回顶部