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医学免疫学-授课教案本科实验教案:
来源:泸州医学院 更新:2013/9/29 字体:

教案首页

第1次课 授课时间:2006年  月   日

课程名称

医学免疫学

年级

05级

专业、层次

临床医学等各专业本科

授课教师

邬于川

职称

副教授

课型(大、小)

学时

3

授课题目

实验室规则、自作小吞噬实验(一)

基本教材及

主要参考书

医学免疫学实验指导 邬于川主编 泸州医学院印刷厂2002   P2~3 

现代免疫学实验技术  沈关心、周汝麟主编 湖北科学技术出版社   1998

目的与要求:

1、掌握小吞噬实验的原理、方法;

2、熟悉实验室规则

教学内容与时间安排:

实验室规则 15min

自作小吞噬实验(一)

小吞噬实验的原理、方法   ---65min

教学方法:讲授、板书、示教

教学重点及如何突出重点、难点及如何突破难点:

教学重点

小吞噬实验的原理、方法

教学难点

小吞噬实验的方法(取血、制片、染色)

提示:取血要精准,防止凝血;制片要自然干燥并固定,防止细菌变形或被冲掉;染色要规范操作,尽量使视野干净,染色性好。

教研室审阅意见:

  教研室主任签名:

   年   月 日

基本内容

教学手段

课堂设计和时间安排

板书提纲

一、实验室规则

二、自作小吞噬实验(一)

(一)原理

小吞噬细胞(中性粒细胞)+金黄色葡萄球菌

(二)材料与方法

豚鼠抗凝血+金黄色葡萄球菌悬液

  混匀

37℃恒温箱静置分层

 

吸取白细胞层

     

制片

 

Right染色:  瑞氏染液数滴

   1分钟

加等量PB液

   5~8分钟

   水冲洗,干燥后油镜下观察

教学进程

分组

一  实验室规则

(一)树立有菌观念,进入实验室前必须穿好工作服;

(二)不能带与实验无关的物品进入实验室,更不允许在实验室内就餐;

(三)介绍实验室环境;

(四)在实验过程中要认真细致;

(五)实验仪器设备若有损坏,须照价赔偿;

(六)值日同学必须切实做好实验室的清洁;

(七)如实验过程中进行了有菌操作,实验结束后须用清洁液泡手3~5分钟。

二  小吞噬实验(一)——(中性粒细胞的吞噬作用)

(Phagocytosis of neutrophilic granulocyte)

【原理】

本实验将中性粒细胞与可被吞噬而又易于计数的颗粒物质(如金黄色葡萄球菌)混合孵育一定时间后,颗粒物质被中性粒细胞吞噬。计算吞噬率和吞噬指数,因此,反映该细胞的吞噬功能。

【材料】

⒈  豚鼠。

⒉ 葡萄球菌悬液。

⒊ 3.8%枸橼酸钠溶液、无菌注射器和针头、试管、毛细吸管、瑞氏染料、载玻片等。

【方法】

⒈ 采集豚鼠心脏血1~2ml或取人外周抗凝血2ml,加入到装有3.8%枸橼酸钠0.2ml的试管中,迅速混匀。

⒉ 加入葡萄球菌悬液一滴,混匀。37℃恒温箱内静置30~60分钟。

⒊ 用毛细吸管从白细胞层(即沉淀的红细胞表面)吸取白细胞悬液,加一滴于载玻片一端,作推片,自然干燥。

⒋ Wright 染色:

⑴ 标本自然干燥后,加瑞氏染液2~3滴于标本的涂膜上,染色1分钟。

⑵ 加等量PBS与染液混合均匀,染色5~8分钟。

⑶ 冲去染液。水冲时为防止染液粘附于涂膜,不能先倾倒掉染液,而要边冲边慢慢倾斜载玻片,直至染液冲尽。

⑷ 干燥后放玻片盒,以备下次实验课观察

清洁卫生安排

讲授

―――――

---板书

www.med126.com/shiti/

―――――

讲授

板书

示教

―――――

讲授

板书

示教

约20min

---约5min

约50min

以上内容可先组织操作,再讲解,共耗时约50min

――――――――-

约40min

约5min

1、小吞噬原理

2、推片方法

3、瑞氏染色方法

4、免疫学实验基本特点

1  在本实验中,影响中性粒细胞吞噬指数的实验因素有哪些?

2  为什么吞噬细胞是机体抗感染的重要防线?如果吞噬功能丧失,

对机体有什么影响?

3  检测吞噬细胞的吞噬作用是否全面反映机体的吞噬功能?为什么?

一、   小吞噬实验(二)

二、   溶菌酶实验

三、   血液细胞的形态与染色

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