方法名称： |
人工栽培南方红豆杉—紫杉醇的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于对人工栽培南方红豆杉枝、叶、皮、种子中紫杉醇含量的测定 |
方法原理： |
本品细粉用甲醇-二氯甲烷(1∶1)超声提取，经液相色谱仪分离，在227nm测定，外标法计算紫杉醇的含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 A lltech 426 型高效液相色谱仪；200型紫外检测器；Alltech 外置工作站。 色谱条件 色谱柱：A lltima C18柱(5mm×250mm，5 µm)；柱温: 室温；流动相: 甲醇-水(65∶35)；流速: 1mL/min；检测波长: 227nm； 每次进样量: 20µL |
试样制备： |
对照品溶液制备 供试品溶液的制备 将人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶子和皮于40℃干燥后碾成粉末(过孔径为0.32 mm的筛)，分别精确称取2.5g于200mL三角瓶中，用100mL混合溶剂浸泡24 h，次日超声震荡提取30min，过滤，残渣用甲醇冲洗3次，合并滤液，30℃下减压浓缩，提取物用水(50mL×3) 和正己烷(50mL×3) 萃取，水层用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷萃取液，然后用活性炭(5g)脱色，过滤，滤液于25℃下减压干燥，用甲醇1mL溶解，0.45µm微孔滤膜过滤，分别配制好种子、枝条、叶和皮的样品制备液， |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液2Oμl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
李俊，牙启康，苏小建等.人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析. 广西师范大学学报(自然科学版).2005，23（2)：68～70 |
