| 公开(公告)号 | CN1441058A |
| 公开(公告)日 | 2003.09.10 |
| 申请(专利)号 | CN02111054.9 |
| 申请日期 | 2002.03.15 |
| 专利名称 | 一种基因重组鲑鱼降钙素的制备工艺 |
| 主分类号 | C12P21/02 |
| 分类号 | C12P21/02;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/16;C07K14/575 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 窦鸿;赵东;朱彤 |
| 发明(设计)人 | 窦鸿;赵东;朱彤 |
| 地址 | 200433上海市翔殷路871弄14号105 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 |
| 代理人 | 陆飞 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种基因重组鲑鱼降钙素的制备工艺，包括：(1)构建含sCT前体cDNA融合表达载体pGEX-sCT前体的工程菌；(2)sCT工程菌的发酵；(3)分离、纯化sCT前体；(4)sCT前体的酰胺化及复性成为成熟sCT；(5)sCT活性的测定；其特征在于构建sCT前体基因时，首先按其氨基酸序列，用大肠杆菌的偏爱密码编码成若干DNA片段，并化学合成DNA片段，再拼接成sCT前体的全长cDNA，所拼接成的全长cDNAN端含蛋氨酸密码子，以便通过CNBr裂解产生与天然sCT完全相同的N端氨基酸序列，C末端为亮氨酸密码子，以便使由大肠杆菌表达出的产物，可用羧基肽酶Y进行C末端酰胺化。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种基因重组鲑鱼降钙素(sCT)的制备工艺，是对原工艺作了许多重要改进，例如，使大肠杆菌基因表达的sCT前体C末端为亮氨酸，以便能使用CPD-Y进行C末端酰胺化；构建的融合表达载体转化由Ecoli.B衍生的大肠杆菌宿主，以避免表达的目的蛋白降解，提高融合蛋白产量等等。本发明方法工艺简单、成本低廉、生产周期短，且不会造成环境污染。 |
| 国际公布 |
